免疫磁珠細(xì)胞分選辦法能夠在幾分鐘內(nèi)從雜亂的細(xì)胞混合物中別離出很高純度的細(xì)胞。把細(xì)胞用超級(jí)順磁性的 MACS MicroBeads (MACS微型磁珠)特異性地符號(hào),磁性符號(hào)完后,把這些細(xì)胞經(jīng)過(guò)一個(gè)放在強(qiáng)而穩(wěn)定磁場(chǎng)中的分選柱。分選柱里的基質(zhì)構(gòu)成一個(gè)高梯度磁場(chǎng)。被磁性符號(hào)的細(xì)胞逗留在柱里而未被符號(hào)的細(xì)胞則流出。當(dāng)分選柱移出磁場(chǎng)后,逗留柱內(nèi)的磁性符號(hào)細(xì)胞就能夠被洗脫出來(lái),這樣就徹底能夠取得符號(hào)和未符號(hào)的兩個(gè)細(xì)胞組份。 超順磁性的MACS MicroBeads 的體積很小,其直徑約為50nm,體積約小于真核細(xì)胞的一百萬(wàn)份之一,可與病毒的巨細(xì)相比。符號(hào)細(xì)胞上的微型磁珠即便在掃描電鏡照片上也簡(jiǎn)直看不到。磁性抗體和磁性符號(hào)物間的反響可在幾分鐘內(nèi)完結(jié)。 因?yàn)?a href="http://www.mohamedadalal.com/products/diangan/" target="_self">微型磁珠的體積極小,所以不會(huì)對(duì)細(xì)胞構(gòu)成機(jī)械性壓力,并且使孵育時(shí)間短,操作過(guò)程快。MicroBeads 構(gòu)成一個(gè)穩(wěn)定的膠體液,它們?cè)诖艌?chǎng)中既不沉淀又不凝集。微型磁珠的巨細(xì)和它的構(gòu)成成份(氧化鐵和多糖)使其可被生物降解,且不會(huì)激活細(xì)胞或影響細(xì)胞的功用和生機(jī),細(xì)胞的生理功用也不變。磁珠不需要去掉,因而,陽(yáng)性分選出的細(xì)胞(即磁性符號(hào)細(xì)胞)可立即用于分析和隨后的試驗(yàn)。 用MACS 細(xì)胞分選體系能夠別離出十分純的細(xì)胞集體,并且有極好的回收率和存活率。根據(jù)細(xì)胞頻率和符號(hào)表達(dá)水平的不一樣,MACS別離細(xì)胞的純度可達(dá)95%-99.9%,回收率>90%。 免疫磁珠法別離細(xì)胞原理: 免疫磁珠法別離細(xì)胞是根據(jù)細(xì)胞表面抗原能與銜接有磁珠的特異性單抗相聯(lián)系,在外加磁場(chǎng)中,經(jīng)過(guò)抗體與磁珠相連的細(xì)胞被吸附而逗留在磁場(chǎng)中,無(wú)該種表面抗原的細(xì)胞因?yàn)椴荒芘c銜接著磁珠的特異性單抗聯(lián)系而沒(méi)有磁性,不在磁場(chǎng)中逗留,從而使細(xì)胞得以別離。 免疫磁珠法分為正選法和負(fù)選法: 正選法-磁珠聯(lián)系的細(xì)胞即是所要?jiǎng)e離取得的細(xì)胞 負(fù)選法-磁珠聯(lián)系不需要的細(xì)胞,游離于上清液的細(xì)胞為所需細(xì)胞 一般來(lái)說(shuō),負(fù)選法比正選法的磁珠用量大 磁珠: 巨細(xì)在0.1-0.45mm 包被了出產(chǎn)的高質(zhì)量單抗磁珠已為白細(xì)胞亞群的分選所優(yōu)化 將包被了特異性單抗的BD IMag磁珠參加細(xì)胞懸液,磁珠特異性地與有相應(yīng)抗原的細(xì)胞亞群聯(lián)系,經(jīng)過(guò)別離得到的連有磁珠的細(xì)胞可直接用于功用試驗(yàn)和用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。 磁別離細(xì)胞的重要目標(biāo)是: 純度和得率,這取決于磁珠所銜接單抗的特異性和磁珠巨細(xì)(磁性),但是太小的磁珠得率不高,太大的磁珠又會(huì)影響細(xì)胞活性,也無(wú)法直接上流式。
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